Оплодотворение в пробирке (FIV)

Метод FIV (fécondation in vitro) или оплодотворение в пробирке – это технология, которая позволяет осуществить оплодотворение вне человеческого тела, соединяя в лабораторных условиях овоциты женщины и сперматозоиды мужчины. Оплодотворенные овоциты, из которых затем развиваются эмбрионы, помещают в матку женщины.

Один цикл FIV (оплодотворение в пробирке) включает ряд этапов :

• Стимуляция яичников
• Приведение в действие овуляции
• Пункция фолликула
• Сбор и подготовка спермы
• Оплодотворение
• Развитие эмбрионов и трансфер
• Хранение избыточных зигот при криогенной температуре.

Стимуляция яичников

Овоциты развиваются внутри яичника, в фолликулах. При естественном менструальном цикле несколько фолликулов входят в фазу роста с момента начала менструации. Только один или два из этих фолликулов достигнет зрелости приблизительно 2 недели спустя и выпустит овоцит в момент разрыва фолликула (овуляция). Фолликулы, которые не достигли зрелости, прекращают расти и дегенерируют. Таким образом, очень небольшое количество овоцитов достигают завершающей стадии овуляции в жизни женщины.

Цель стимуляции яичников при FIV – это помещать перерождению фолликулов вводя необходимую дозу ФСГ. Прописывая ФСГ в форме инъекции, достигается его более высокий уровень в крови, что способствует развитию большего количества фолликулов и созреванию большего количества овоцитов. Увеличение количества фолликулов, называемое также гиперстимуляция яичников под контролем, повышает шансы на успех при FIV, умножая число возможных эмбрионов (Узнать больше).

Приведение в действие овуляции

Когда фолликулы достигли необходимой величины и уровень эстрогенов в крови достаточный, заключительную фазу их созревания и выход овоцитов провоцируют с помощью инъекции хориогонадотропина человека - hCG (Choriomon®, Ovitrelle®, Pregnyl®). Пункция фолликулов (и сбор овоцитов) планируется приблизительно через 35 часов после инъекции

Пункция фолликулов

Пункция фолликулов с целью сбора овоцитов осуществляется в клинике Clinique Générale-Beaulieu. С примененнием общей анестезии эхографический щуп, снабженный направляющим устройством, вводят через влагалище, и он помогает идентифицировать фолликулы. Тонкая игла вводится через направляющий «гид» в пространство влагалища, затем в яичник и прокалывает фолликулы один за другим. Фолликулярная жидкость, содержащая овоциты, засасывается и собирается в пробирку. Процедура занимает 15-20 минут. Во время процедуры пробирки с фолликулярной жидкостью хранятся при температуре тела в специальном инкубаторе. Затем они незамедлительно переправляются в лабораторию, где биолог определяет количество собранных овоцитов. Благодаря стимуляции яичников собирают в среднем 5-10 овоцитов. Пациентку переводят в палату, где ей в течение следующего часа сообщат результат пункции. По прошествии 3-4 часов под наблюдением она может возвращаться домой.

 

Сбор и подготовка спермы

В день пункции супруг собирает сперму путем мастурбации, она будет использована для оплодотворения.

Центр ЭКО клиники Женераль Больё располагает соответствующими помещениями комфортабельными и защищенными, для этой процедуры. Этот этап, хотя и несложный, может стать причиной значительного и объяснимого стресса.

В случае затруднений можно организовать сбор спермы заранее и потом ее хранить при криогенной температуре вплоть до дня оплодотворения. В случаях, когда сперма была получена хирургическим путем из яичек или из выводящих канальцев, это будет сперма, сначала замороженная при криогенной температуре, а потом приготовленная к использованию.

Но каково бы не было ее происхождение, сперма рассматривается и затем подготавливается одним и тем же способом. Семенная жидкость, которая сокращает оплодотворяющую способность спермы, устраняется и сперматозоиды, наиболее подвижные, а значит, более оплодотворяющие, отбираются в пробирку.

Затем осуществляется осеменение овоцитов. В зависимости от типа бесплодия оплодотворение делают случайным (FIV) или наоборот контролируемым (ICSI).

Оплодотворение

Существует два метода оплодотворения овоцитов: так называемое «классическое» оплодотворение в пробирке (FIV) и интрацитоплазматическая сперматозоидная инъекция (ICSI).
FIV используется, когда бесплодие по происхождению женское, а качество спермы нормальное или чуть-чуть искаженное. Через несколько часов после пункции фолликула овоциты соединяются со сперматозоидами на питательной среде, способствующей их выживанию. Среда помещается для хранения при 37 градусах от 4 до 20 часов. Только один сперматозоид – наиболее активный – преодолеет zonа pellucidа и плазматическую мембрану яйцеклетки и сумеет осуществить оплодотворение.

По истечении 18-20 часов биолог смотрит через микроскоп, произошло ли оплодотворение. Оплодотворенный овоцит имеет вид клетки с двумя ядрами (пронуклеусами), одно по происхождению отцовское, другое – материнское. На этой стадии клетка называется зиготаe.

Зигота – это пока ещё не эмбрион, потому что отцовский и материнский генетический материал пока что не объединился. На этой стадии биолог отбирает для будущего трансфера в матку 2 или 3 зиготы. А остальные зиготы замораживают, и они будут использоваться при следующих попытках.. Иногда обнаруживаются какие-либо аномалии оплодотворения, которые не позволяют образоваться зиготам для помещения в матку и для хранения при криогенной температуре на будущее.

Развитие эмбрионов и трансфер

Через два-три дня после сбора овоцитов эмбрионы помещаются в матку. На второй день эмбрион делится на 2 - 4 клетки, к 3 дню они достигают стадии 6-8 клеток.

рансфер эмбриона в матку процедура безболезненная. Эмбрионы помещаются в тонкий и гибкий катетер. Раскрыв шейку матки зеркалом-расширителем врач осторожно вводит в полость матки катетер с эмбрионом. Иногда перенос эмбриона в матку осуществляется под контролем эхографии, чтобы направлять движение катетера внутри матки и свидетельствовать, что эмбрионы помещены в правильное место.

Чаще помещают в матку два или три эмбриона. Решение о количестве эмбрионов принимают в беседе с врачом в зависимости от возраста женщины и от пожеланий супружеской пары. В Швейцарии закон не позволяет помещать в матку более трех эмбрионов за один раз.

Примерно через 12 дней после процедуры помещения в матку эмбрионов производят забор крови, чтобы сделать тест на беременность, который позволит узнать результат процедуры. Если тест положительный, то планируют эхографию примерно через 4 недели после трансфера, чтобы проконтролировать нормальное течение беременности.

Хранение лишних зигот при криогенной температуре

Нередко так случается, что образуется больше зигот, чем желательно для трансфера в матку. Избыточные зиготы могут храниться при очень низкой температуре в жидком азоте (замораживание или криоконсервация).

Цель криоконсервации зигот – это дать паре несколько возможностей достигнуть беременности, уменьшая вероятность множественной беременности и возможных осложнений. Зиготы могут быть заморожены и перенесены в матку в дальнейшем, если не получилось беременности в первом цикле. В этом случае этапы стимуляции яичников и пункции фолликулов ну нужно будет повторять.